小麦高分子量谷蛋白1Dx2基因启动子的克隆及功能鉴定

摘要

以小偃6号基因组DNA为模板,利用聚合酶链式反应扩增到1kb左右的核酸序列,将其克隆到pMD18-T载体上.经测序鉴定及序列分析后得知,该片段为小麦高分子量谷蛋白基因(HMW-GS 1Dx2)上游启动子及信号肽编码区,共1 050 bp.将其与β-葡糖苷酸酶(GUS)基因编码序列融合,用基因枪法将构建的嵌合基因转入小麦未成熟种子及叶片,检测其瞬时表达活性.组织化学检测表明,由该启动子驱动的GUS融合基因能在种子中表达,而在叶片中却未见表达,从而证实此HMW-GS1Dx2启动子具有在小麦胚乳中高效表达的活性,为小麦胚乳生物反应器的研究奠定了基础.