伪狂犬病病毒UL24基因的原核表达及抗UL24蛋白抗体的制备

摘要

为了给伪狂犬病病毒(PrV)UL24蛋白的细胞定位和功能研究提供参考依据,据GenBank公布的PrV UL24基因序列(登录号NC006151)设计1对引物,以质粒pUL24-GFP为模板,用PCR方法扩增出部分缺失的基因片段mUL24 (modified UL24).将mUL24片段定向克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,构建融合表达载体pET-UL24.阳性质粒转化宿主菌E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导,重组蛋白 (His)6-UL24以包涵体的形式获得表达.用纯化后的pET-UL24融合蛋白免疫家兔,ELISA分析表明,在血清效价达到1∶2 560以上,Western-blot分析制备的抗体可以和pET-UL24表达产物发生反应,具有良好的免疫特异性.