脱氧雪腐镰刀菌烯醇对PC12细胞自噬的影响

摘要

[目的]研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)对PC12细胞自噬的影响.[方法]以不同质量浓度(0(CK),125,250,500,1 000和2 000 ng/mL)的DON处理PC12细胞24 h后,采用倒置显微镜、透射电镜、免疫荧光、荧光定量PCR、Western-blot等技术,研究DON对PC12细胞形态和超微结构、LC3聚点率及自噬相关基因classⅢPI3K、Beclin-1、P62 mRNA和蛋白LC3Ⅱ、P62、classⅢPI3K表达的影响.[结果]不同质量浓度的DON均可诱导PC12细胞自噬,各试验组细胞自噬水平均高于对照组(CK),并随着DON质量浓度的增大而先增加后下降,在DON质量浓度为1 000 ng/ mL时达到峰值.与对照组相比,各试验组classⅢPI3K mRNA和Beclin-1mRNA表达水平均极显著增高(P＜0.01),P62 mRNA表达水平随着DON质量浓度的增加总体呈下降趋势,差异达显著(P＜0.05)或极显著(P＜0.01)水平.Western-blot结果显示,LC3Ⅱ蛋白表达量在DON质量浓度为1 000ng/mL时最高,与对照组相比,250～2 000 ng/mL DON处理组的LC3Ⅱ蛋白表达量显著(P＜0.05)或极显著(P＜0.01)增加;500～2 000 ng/mL DON处理组classⅢPI3K蛋白表达量较对照组显著(P＜0.05)或极显著(P＜0.01)增加,其中以1 000 ng/mL DON处理组表达量最高;与对照组相比,不同质量浓度DON处理组P62蛋白表达量均极显著降低(P＜0.01),其中以1 000 ng/mL DON处理组最低.[结论]DON能够诱导PC12细胞发生自噬,自噬相关基因classⅢPI3K、Beclin-1、P62及蛋白LC3Ⅱ、P62、classⅢPI3K等参与了DON诱导PC12细胞自噬的调控.