下调REV3通过激活p53诱导结肠癌细胞THC-8307凋亡

摘要

目的 利用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术下调结肠癌细胞THC-8307中REV3表达,观察细胞凋亡并探讨p53在该凋亡过程中的作用.方法 以人高分化结肠癌细胞系(THC-8307)为研究对象,进行REV3及p53干扰质粒的转染.通过实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)和免疫荧光技术检测干扰效率.利用流式细胞仪检测细胞凋亡率,以qRT-PCR和Western blot检测各组p53的表达量.同时,对REV3及p53进行两质粒共转染实验,同时下调REV3和p53后两组细胞的凋亡率.结果 下调REV3诱导THC-8307细胞早期凋亡率和晚期凋亡率明显增加(P＜0.01),且实验组p53表达量明显增高;REV3-p53同时下调与REV3单独下调相比,细胞凋亡率明显减低.结论 下调REV3通过激活p53诱导结肠癌细胞THC-8307凋亡.