前列腺癌细胞Ku70表达水平对放射敏感性的影响

摘要

目的 探讨前列腺癌PC3细胞Ku70表达水平变化及结合热休克对放射敏感性的影响.方法 通过siRNA技术调节前列腺癌PC3细胞内源性Ku70蛋白表达,筛选转染后的PC3-Ku70(Ku70组)、PC3-β-actin(vector组)、PC3-Ku70-siRNA(RNAi组)、PC3-β-actin-siRNA(Scramble组)等4种稳定细胞株.采用免疫印迹和逆转录PCR方法检测其Ku70蛋白及mRNA表达水平,4组对数生长期细胞分别行Annexin V-FIC双染色及DAPI、TUNNEL染色检测细胞周期与凋亡情况,另取1株PC3-Ku70- siRNA细胞(热休克组)经42℃水浴30 min,转37℃细胞培养12 h再行射线照射,观察不同组间细胞存活率差异.结果 免疫印迹和逆转录PCR显示RNAi组细胞Ku70表达水平明显下降,细胞周期与凋亡检测等检测显示伴随着Ku70表达降低,存活细胞减少,凋亡细胞增多,5组细胞随γ射线照射剂量的增加,细胞存活率下降,其中RNAi组的细胞存活率均低于对照组和Ku70组,5组比较差异有统计学意义(F=21.72,P＜0.001).PC3-Ku70- siRNA细胞经热休克处理后再行射线照射,其存活率明显低于未经热休克处理细胞株.结论 抑制前列腺癌细胞中Ku70蛋白表达水平,结合热休克,可明显提高肿瘤组织对放射治疗的敏感性,这可能是一个较为理想的综合治疗前列腺癌的方法.