检测克氏原螯虾白斑综合征病毒(WSSV)的巢式PCR方法的建立与初步应用

摘要

根据GenBank中已发表的3株WSSV的VP28基因序列,设计了4条特异性引物.通过筛选最佳反应条件和试剂工作浓度,建立了检测克氏原螯虾WSSV的巢式PCR方法.该方法第一轮扩增的敏感性是36 ng,第二轮扩增的敏感性是36 pg.在对9份克氏原螯虾临床病料的巢式PCR检测中,用引物W1和W2做第一轮扩增,未检测到阳性病例;用引物S1和S2做第二轮扩增,检测到一例WSSV阳性病例.以上结果表明:对于检测克氏原螯虾WSSV,巢式PCR较一步PCR具有更高的检测灵敏度和应用前景.