同时检测犬瘟热、犬流感和犬副流感病毒多重RT-PCR方法的建立和初步应用

摘要

为建立检测多种犬呼吸通病毒的多重PCR方法,本研究根据GenBank记录的大瘟热病毒(CDV)的NP基因序列,犬流感病毒(CIV)的M基因序列和大副流感病毒(CPIV)的NP基因序列,设计合成三对特异性引物.通过优化反应条件,建立同时扩增CDV(900bp)、CPIV(667bp)和CIV(244bp)的多重PCR方法.实验结果表明:在同一PCR反应体系中可同时检测到以上三种病毒;特异性实验可检测到CDV、CPIV、CIV三种病毒,而作为阴性对照的FCV不可检出;CDV、CPIV和CIV的最低敏感度可达到0.03μg/μL.