转染靶向hTERT miRNA表达框架对K562细胞端粒酶活性及增殖活性的影响

摘要

目的:设计靶向端粒酶逆转录酶(telomerase reverse transcriptase,hTERT)的miRNA表达框架,探讨其对hTERT的表达、端粒酶活性及K562增殖的影响,以期为慢性髓系白血病提供新的基因治疗策略.方法:构建靶向hTERT的miRNA表达框架,脂质体法转染K562细胞,银染法及荧光定量PCR法检测端粒酶活性及hTERT的表达情况.Annexin V/PI双染检测细胞凋亡.结果:miRNA表达框架转染48 h后,hTERT的表达明显下降,端粒酶活性明显减低,K562细胞凋亡率增加.结论:靶向hTERT的miRNA表达框架能够有效干扰hTERT的表达,抑制端粒酶活性,诱导K562细胞的凋亡.以miRNA表达框架为基础的RNAi技术,有望成为分子水平治疗慢性髓系白血病的有效工具.