HPLC 法测定人肝微粒体中藏花酸的浓度

摘要

目的建立一种测定人肝微粒体孵育体系中藏花酸浓度的HPLC 内标法.方法在人肝微粒体温孵体系中加入藏花酸样品进行孵育反应,反应结束后用冰乙腈终止反应.经沉淀法处理样品后,采用DiamonsilC18色谱柱（4.6mm×150mm,5μm）进行分离.流动相：甲醇2% 冰乙酸水溶液（75：25,v/v）;流速：1.0 mL·min-1;柱温：30 ℃;紫外检测波长：440nm;内标：吲哚美辛.结果藏花酸经孵育反应后质量浓度测定方法的线性范围为0.125～8μg·mL-1,线性关系良好（R2 =0.9999）.藏花酸低、中、高质量浓度的提取回收率分别为：97.24%、96.58%、98.12%,其RSD 均小于15%,批内、批间差异〈15%,准确度为85%～115%.结论该HPLC 法简便、准确,符合生物样品测定的要求,能快速、可靠地检测人肝微粒体中藏花酸的浓度.