NS特异性siRNA真核表达载体的构建

摘要

目的:构建nucleostemin(核干细胞因子,NS)特异性siRNA真核表达载体.方法:以小鼠组织基因组DNA为模板,PCR方法克隆小鼠编码U6 snRNA基因的启动子,将NS-siRNA表达序列、PolⅢ识别的终止信号与U6启动子连接起来,并将其插入pcDNA4/C载体中.结果:(1)从小鼠基因组DNA中克隆到编码U6 snRNA基因的启动子,(2)构建了含有U6启动子、NS-siRNA表达序列和PolⅢ识别终止信号的NS-siRNA表达的片段,(3)将NS-siRNA表达片段插入了pcDNA4/C真核表达载体.结论:构建了针对NS 特异性的siRNA真核表达载体pcDNA4/C-NS-Silencer.