密度梯度离心和贴壁法分离大鼠骨髓间充质干细胞增殖活性和成骨功能比较

摘要

目的通过比较密度梯度离心和贴壁筛选两种方法所获MSCs的增殖活性和成骨功能,探索骨髓MSCs体外分离和纯化较好的方法,为MSCs进一步的试验研究提供依据.方法应用密度梯度离心和贴壁筛选两种方法分离纯化骨髓MSCs,并通过MTT法检测其增殖活性.用第三代MSCs进行骨向诱导,以观察两种方法所获MSCs是否有相似的骨向分化能力.结果密度梯度离心法所获MSCs纯度高,杂质细胞少,增殖活性强,常表现为梭形和小多角形,7到10天内便可达到融合.而贴壁法所获MSCs纯度低,红细胞、破骨样细胞等杂质细胞较多,增殖速度相对较慢,且经数次传代仍有较多杂质细胞存在.经骨向诱导后,两种方法所获MSCs表现出相似的ALP活性和矿化结节形成能力.矿化结节数目在两组比较无显著性差异(P＞0.05).结论密度梯度离心法是体外分离和纯化骨髓MSCs较好的方法,所获细胞增殖活性高.两种方法所获MSCs具有相似的骨向分化能力.