NuSAP1通过Wnt/β-catenin/EMT通路促进三阴性乳腺癌细胞增殖和侵袭及其对预后的预测价值

摘要

目的:分析核仁纺锤体相关蛋白(NuSAP1)的表达对乳腺癌(BC)患者预后的影响,探讨三阴性乳腺癌(TNBC)细胞株的致瘤机制。方法:我们从癌症基因组图谱(TCGA)下载了乳腺癌(BC)的RNA-seq数据,用R软件在此数据中筛选出了NuSAP1基因及BC患者的临床资料。生存曲线用Kaplan-Meier-plotter绘制。建立阴性对照组(NC)、敲减NuSAP1组(sh-NuSAP1)、过表达NuSAP1组(sh-NuSAP1+ov-NuSAP1),用细胞增殖毒性检测试剂盒(CCK8)和Transwell法检测各组细胞增殖和侵袭能力。实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)和免疫印迹法(Western blotting)检测肿瘤细胞中NuSAP1、Wnt/β-catenin通路和上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白的表达。结果:NuSAP1在BC中表达上调。NuSAP1表达差异与多种临床病理因素有关,且NuSAP1表达越高,生存期越短。在MDA-MB-231和BT-549细胞中,与NC组相比,sh-NuSAP1组细胞增殖和侵袭能力下降,CyclinD1、Vimentin、Slug、Twist、Wnt3a和p-β-catenin的表达减少,而E-cadherin的表达显著增加。与sh-NuSAP1组相比,sh-NuSAP1+ov-NuSAP1组结果与上述相反。结论:NuSAP1是一种致癌基因,预测乳腺癌的不良预后,并通过Wnt/β-catenin和上皮-间充质转化(EMT)途径促进肿瘤进展。