下调PHLDB3对胃癌耐药细胞系SGC7901/ADR药物敏感性的影响

摘要

目的:探讨下调PHLDB3对胃癌耐药细胞系SGC7901/ADR药物敏感性的影响.方法:采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹技术(Western blot)的方法检测胃癌及癌旁正常组织中PHLDB3的表达(分别是20对和10对);qRT-PCR和Western blot检测PHLDB3在胃癌细胞系SGC7901以及胃癌耐药细胞系SGC7901/ADR和SGC7901/VCR中的表达;MTT法检测SGC7901、SGC7901/ADR及转染PHLDB3 siRNA后SGC7901/ADR的半数抑制浓度(IC 50)值;流式细胞仪检测细胞凋亡.结果:qRT-PCR和Western blot结果显示:PHLDB3在胃癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织(P<0.0001);PHLDB3在耐药细胞系SGC7901/ADR和SGC7901/VCR中的表达明显高于其亲本细胞系SGC7901(P<0.0001和P<0.05).Western blot结果显示:相对于转染PHLDB3 negative control(NC)组,转染PHLDB3 siRNA组的SGC7901/ADR细胞中PHLDB3的表达降低(P<0.005).MTT结果显示:SGC7901与SGC7901/ADR的IC 50值分别为(1.5±0.1)μg/ml与(5.5±0.2)μg/ml(P<0.0001);SGC7901/ADR转染PHLDB3 siRNA后对顺铂的IC 50值明显下降(P<0.05).流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测凋亡,结果显示:下调PHLDB3的表达后,SGC7901/ADR细胞的凋亡率明显增加(P<0.05).结论:PHLDB3能够促进胃癌细胞系SGC7901/ADR产生多药耐药.