Exosomes致敏的脐血树突细胞介导的抗K562细胞作用

摘要

目的分离K562细胞释放的exosomes,致敏脐血树突细胞(dendritic cell,DCs),观察其对细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic Tlymphocytes,CTLs)的激活效应.方法离心超滤和蔗糖密度梯度离心法分离K562细胞释放的exosomes,固相免疫电镜法(SPIEM)制备exosomes的HSP70、ICAM-1及ABL免疫电镜标本.常规方法从脐血单个核细胞诱导DCs并分离T细胞,将K562细胞来源的exosomes冲击或未冲击的DCs与T细胞共培养.MTT比色法检测体外细胞毒活性.结果K562细胞分泌的exosomes为直径50～100nm的膜性微囊.Exosomes致敏的脐血DCs激活CTLs的能力显著高于肿瘤冻融抗原致敏的DCs组,在效靶比为50:1时,两组CTLs对K562细胞的杀伤率为(68.4%vs35.3%,P＜0.05).结论K562细胞分泌的exosomes负载脐血DCs后活化CTLs,有抗肿瘤活性.