单抗C225致人肺鳞癌H-520细胞生长抑制和凋亡增加的研究

摘要

目的:观察表皮生长因子受体单克隆抗体C225对人肺鳞癌细胞系(H-520)生长、凋亡和周期分布的影响.方法:流式细胞检测H-520细胞EGFR表达比例,将鼠抗人EGFR一抗和FITC标记的羊抗鼠二抗加入细胞悬液中,孵育、漂洗重悬细胞后流式检测.MTY法测定C225抑制H-520细胞生长最佳浓度和最佳时间,将不同浓度C225加入指数生长的细胞培养液中,继续培养一定时间(48h),检测细胞生长抑制率.流式细胞仪检测细胞凋亡以及细胞周期.结果:H-520细胞中EGFR表达比例高达82.25%.C225抑制H-520细胞生长的最佳浓度是40nmol/L,最佳作用时间是72h.细胞凋亡实验结果显示,H-520细胞自然凋亡率为5.56%±0.62%,C225可使其凋亡百分率上升到13.75%±0.83%(P＜0.05).细胞周期分布显示40nmol/L C225可使细胞阻滞于G0+G1期,S期细胞比例下降.结论:C225对H-520细胞生长抑制作用,可能与细胞G0+G1期阻滞后凋亡有关.