降低S100A6基因表达对胃癌细胞生物学特性影响的研究

摘要

目的:初步探讨S100A6基因对于胃癌细胞生长、增殖状态,细胞周期,凋亡状态等生物学特性及成瘤、浸润转移能力等恶性表型的影响.方法:S100A6基因的RNAi载体通过脂质体介导法转染S100A6基因高表达SGC7901细胞,后经G418压力筛选法获得稳定转染的细胞系,经过RT-PCR法、免疫细胞化学法及Western-bloting法证实.对稳定表达株进行鉴定,而后使用流式细胞仪、生长曲线法、平板克隆形成实验法、细胞迁徙实验等方法分析稳定表达株相关生物学特性与恶性表型的变化,每种检测实验均设立RNAi载体稳定转染细胞组、IMG800空载体稳定转染细胞组和空白SGC7901细胞组.结果:稳定的S100A6基因RNAi细胞系经过RT-PCR法、免疫细胞化学法及Western-bloting法证实,mRNA抑制率可达75%左右,蛋白产物的抑制率达85%左右.与转染IMG800空载体及空白SGC7901胃癌细胞相比转染S100A6 RNAi载体的稳定表达细胞株生长减慢,各时间点细胞计数显著低于对照组(P<0.05);后两组之间亦无显著差异,细胞周期检测显示S100A6 RNA干扰组G0-G1期比例显著高于对照组,而G2-M及S期比例显著低于对照组(P<0.05),其它各期细胞比例均无显著差异.平板克隆形成实验结果显示S100A6 RNA干扰组克隆形成率显著低于对照组(P<0.05);,细胞迁徙实验结果提示S100A6 RNA干扰组穿膜率显著低于对照组(P<0.05).结论:S100A6基因可能具有促进细胞生长增殖作用,同时可影响细胞周期,增加处于分裂期细胞的比例可能具有促进细胞分裂作用,并可促进胃癌细胞侵袭转移.降低S100A6基因表达可能抑制胃癌细胞的恶性生物学行为.