双歧杆菌属特征性酶F6PPK测定条件的优化

摘要

以两歧双歧杆菌为材料,进行了双歧杆菌属特征性酶F6PPK测定条件的优化.实验首先改良了原初文献(Scardovi 法)F6PPK酶活测定中对照反应管的设置,又对双岐杆菌培养时间、细胞破碎方法、底物农度、比色波长、反应温度等条件进行了优化.实验表明,双岐杆菌培养18 h.收集菌体,以超声波法破碎细胞制备粗酶液,采用4%的底物浓度,将酶液与底物于40℃保温30 min,最终反应物于500nm比色,所得F6PPK酶活测定结果更可靠.