苜蓿中华根瘤菌matB基因的克隆及其功能的研究

摘要

通过同源性分析,发现苜蓿中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)菌株Rm1021中matB基因与三叶草生物型豌豆根瘤菌(Rhizobium leguminosarum by.trifolii)和慢生型大豆根瘤菌(Bradyrhizobium japonicum USDA110)中编码丙二酸单酰辅酶A合成酶(malonyl-CoA synthetase)基因在氨基酸水平上分别达到了75%和67%一致性,具有高度同源性.因此,从Rm1021中克隆出matB基因,并在大肠埃希菌(Escherichia coli)中进行体外诱导表达和纯化.纯化的MalB蛋白具有丙二酸单酰辅酶A合成酶的活性.测定的Km值是710 μmol,Vmax是0.209 μmol/min/mg.