苜蓿中华根瘤菌042BM noeA基因的克隆、敲除与功能的初步分析

摘要

通过PCR扩增获得了042BM的noeA基因.该基因与苜蓿中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)1021noeA的同源性为99%,而其NoeA与1021NoeA的相似性为97%.还发现其NoeA与中慢生根瘤菌(Mesorhizobium sp.)BNC1可能的SAM-依赖性的甲基转移酶相似性为32%,而其303～362氨基酸区域与大肠杆菌(Escherichia coli)的核糖体50S亚基的L11蛋白甲基转移酶(PrmA)的160～220氨基酸区域的相似性达到41%.通过插入卡那盒,敲除noeA,获得突变株042BMA-Km.与苜蓿中华根瘤菌042BM相比,敲除noeA的突变株在普通紫花、保定、宁夏、百发和傲汉苜蓿品种上的结瘤数、根瘤鲜重和植株地上部分的干重都有不同程度的增加,而在秘鲁苜蓿品种上的结瘤数和植株地上部分的干重明显下降,在皇后和美国杂花苜蓿品种上则没有明显的变化.