基因免疫制备西尼罗病毒NS5蛋白特异性单抗

摘要

研究了NS5蛋白在西尼罗病毒的特异性检测方面的应用及NS5在黄病毒复制中的作用机理.采用RT-PCR方法扩增了西尼罗病毒株的NS5基因片段,将其克隆至真核表达载体pVAX1,构建真核表达质粒.以重组质粒免疫BALB/c小鼠后取脾脏进行杂交瘤细胞融合,建立能稳定分泌西尼罗NS5单克隆抗体的杂交瘤细胞株.构建了真核表达质粒pVAX1-WNV-NS5,免疫动物后获得了2B2B9等 4 株稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株,均为IgM型.真核表达质粒免疫后成功地诱导了针对NS5蛋白的体液免疫应答,单抗特异性分析显示 4 株单抗与其他黄病毒存在一定交叉反应.