组蛋白H3K27me3介导JAK2/STAT3信号通路对足细胞损伤的调控机制

摘要

目的:探讨组蛋白H3K27me3介导JAK2/STAT3信号通路对足细胞损伤的调控机制.方法:体外培养小鼠肾足细胞MPC5,随机分为对照组及EZH2-组.EZH2-组小鼠肾足细胞给予EZH2酶抑制剂(EPZ-6438)干预,对照组给予等量PBS培养.应用Western Blot法检测足细胞组蛋白H3K27me3、p-JAK2、JAK2、p-STAT3、STAT3蛋白水平;实时定量PCR法检测足细胞JAK2、STAT3 mRNA水平;ChIP-chip确定组蛋白H3K27me3调控靶基因群,利用MACS2软件得出组间差异富集峰,进行基于GO、KEGG数据库的功能注释分类和通路富集分析.结果:与对照组相比,EZH2-组足细胞H3K27me3蛋白表达显著下降(P<0.05),JAK2/STAT3信号通路相关基因及蛋白表达显著增加(P<0.05);GO富集分析发现靶基因Pigu基因呈现显著性富集,其参与JAK/STAT信号通路调控;KEGG富集分析发现靶基因参与调控信号通路主要集中在细胞溶质DNA感应途径、Rap1信号通路、Toll样受体信号通路、HIF-1信号通路和JAK/STAT信号通路,其中靶基因IL12rb1、IL5ra呈现显著性富集,其参与JAK/STAT信号通路调控.结论:组蛋白H3K27me3可能通过调控靶基因Pigu、IL12rb1、IL5ra参与JAK2/STAT3信号通路活化,导致足细胞损伤.