微小RNA-664a-3p在乳腺癌组织的表达及对乳腺癌细胞生物学行为的影响

摘要

目的 观察微小RNA-664a-3p(miR-664a-3p)在乳腺癌组织中的表达及其对乳腺癌细胞生物学行为的影响.方法 提取16例乳腺癌手术标本及其癌旁组织中总RNA,使用荧光实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测miR-664a-3p在乳腺癌及其癌旁组织中的表达量,并检测miR-664a-3p在4种乳腺癌细胞株(T47D、MDA-MB-231、BT-549、MCF-7)及正常乳腺上皮细胞MCF-I0A中的表达.选取miR-664a-3p表达水平最低的乳腺癌细胞瞬时转染miR-664a-3p模拟物(实验组)或miR-NC(对照组).qPCR检测转染后细胞中miR-664a-3p的表达.生物信息学软件预测miR-664a-3p的靶基因.使用荧光素酶报告基因实验检测miR-664a-3p对靶基因肿瘤内皮标志物8(TEM8)的靶向作用.qPCR和Western blot法检测TEM8及下游基因的表达.流式细胞术检测细胞周期,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力.结果 乳腺癌组织中miR-664a-3p的表达量显著低于癌旁组织(P＜0.01).乳腺癌细胞株中miR-664a-3p的表达量显著低于正常乳腺上皮细胞(P＜0.05),其中T47D细胞的表达量最低(P＜0.05).实验组和对照组T47D细胞中miR-664a-3p的表达量分别为24.87±2.17和1.02±0.10(P＜0.01).miR-664a-3p可与TEM8-3'-非编码区(UTR)特异性结合(P＜0.01).与对照组比较,实验组中TEM8 mRNA及蛋白表达下调(P＜0.05).转染miR-664a-3p能够显著抑制T47D细胞周期的进展(P＜0.05),降低细胞的增殖能力(P＜0.01),抑制细胞的侵袭能力(P＜0.01).结论 miR-664a-3p在乳腺癌组织和细胞株表达下调,过表达miR-664a-3p能够通过靶向抑制TEM8基因的表达,抑制乳腺癌细胞的增殖和侵袭能力.