苦参素对H2O2诱导乳鼠心肌细胞氧化应激损伤保护作用的研究

摘要

目的 研究苦参素(oxymatrine,OMT)对H2O2诱导乳鼠心肌细胞氧化应激损伤的保护作用.方法 无菌环境下分离并培养乳鼠心肌细胞72h后随机分为空白对照组、H2O2(200 μmol/L)干预组、OMT(20、40、60μmol/L)+H2O(200μmol/L)干预组,每组设10个复孔.药物干预12h后,MTT法检测细胞存活率,采用氧敏感荧光探针DCFH-DA检测氧自由基(ROS);测定细胞中抗氧化酶(SOD、GSH-Px、CAT)活性和丙二醛(MDA)含量,检测细胞培养液中心肌酶(AST、CPK、LDH)含量,流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞凋亡并计算凋亡率,Western blot法检测细胞中caspase-3 、NF-κB蛋白表达并进行半定量分析.结果 与H2O2(200μ mol/L)干预组比较,OMT(40、60μ mol/L)干预12h能够显著提高H2O2诱导损伤乳鼠心肌细胞存活率,降低ROS含量,改善SOD、GSH-Px、CAT活性并降低MDA含量,降低培养基中AST、CPK、LDH含量,降低细胞凋亡率,降低caspase-3 、NF-κB蛋白表达,差异均有统计学意义(P ＜0.05,P ＜0.01).结论 苦参素可能通过改善抗氧化酶活性而提高氧自由基清除能力、抑制促凋亡蛋白表达而降低细胞凋亡,对H2O2诱导乳鼠心肌细胞氧化应激损伤起到保护作用.