托烷司琼对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用与机制

摘要

目的托烷司琼是一种选择性α7nAchR激动剂药物,具有抑制炎症反应与细胞凋亡的作用。文章旨在探讨托烷司琼对缺氧/复氧(H/R)后H9C2心肌细胞损伤的保护作用与机制。方法将培养好的H9C2心肌细胞,按实验方案分组:正常组(不予处理,正常培养)、溶剂对照组(加托烷司琼培养18 h,终浓度为10 nmol/L)、缺氧/复氧组(缺氧12 h,复氧6 h)、托烷司琼组(缺氧/复氧前托烷司琼预处理1 h,终浓度为10 nmol/L)、MLA拮抗剂组(缺氧/复氧前MLA预处理2 h,终浓度为10 nmol/L)、托烷司琼+MLA拮抗剂组(缺氧/复氧前2 h加MLA,1 h后加托烷司琼,终浓度均为10 nmol/L),利用乳酸脱氢酶释放试验测定细胞乳酸脱氢酶活性,ELISA法测定细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)的浓度,CCK-8法检测细胞增殖,细胞免疫荧光染色检测细胞Cleaved caspase-3表达量,Western blot法检测p-p38、p-pka与凋亡蛋白Cleaved caspase-3的表达水平。结果与正常组比较,缺氧/复氧组TNF-α、IL-1β和LDH浓度明显增加(P<0.01);与缺氧/复氧组比较,托烷司琼处理组TNF-α、IL-1β和LDH浓度明显减少(P<0.05)。托烷司琼组p-p38、Cleaved caspase-3表达(0.46±0.05,0.51±0.03)较缺氧/复氧组(0.62±0.05,0.67±0.05)下调(P<0.05),p-pka表达水平(0.38±0.06)较缺氧/复氧组(0.19±0.05)升高(P<0.05)。托烷司琼+MLA拮抗剂组Cleaved caspase-3蛋白表达(0.99±0.08)和p-p38蛋白表达(1.18±0.06)较托烷司琼组(0.75±0.08、0.93±0.11)均升高(P<0.05)。结论托烷司琼可通过激活α7nAchR抑制p38 MAPK信号通路减轻H9C2心肌细胞缺氧/复氧后炎症反应及细胞凋亡,进而起到心肌保护作用。