香豆素苷通过PI3K/AKT/mTOR通路保护糖尿病肾病大鼠足细胞损伤的机制研究

摘要

目的探究香豆素苷(coumarin glycosides)通过调控磷脂酰肌醇-3激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)-蛋白激酶B(AKT)-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路对糖尿病肾病大鼠足细胞损伤的影响机制。方法采用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)腹腔注射构建大鼠糖尿病肾病模型,并用不同浓度的香豆素苷类化合物圆锥绣球(hydrangea paniculata,HP)提取物处理模型肾病大鼠,实验室检查大鼠血糖、尿蛋白以及内生肌酐清除率。免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)检测大鼠足细胞凋亡情况,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(quantitative reverse transcriptase-polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测足细胞裂孔膜蛋白Nephrin和Prodocin以及足细胞损伤标志蛋白Desmin蛋白的mRNA表达,Western印迹检测PI3K/AKT/mTOR信号通路及其磷酸化的蛋白表达。结果HP可显著改善模型大鼠的肾功能,与正常组相比,模型组的纤维连接蛋白和Ⅳ型胶原的表达明显上升,Nephrin和Prodocin的表达显著下调,Desmin的表达显著上调,PI3K/AKT/mTOR的磷酸化水平明显下降(P<0.05)。与模型组相比,随着HP浓度的增加,纤维连接蛋白和Ⅳ型胶原的表达随之下降,HP剂量依赖性地上调Nephrin和Prodocin,并下调Desmin,同时显著激活PI3K/AKT/mTOR信号通路(P<0.05)。结论香豆素苷可通过活化PI3K/AKT/mTOR信号通路,发挥减轻糖尿病肾病模型大鼠足细胞损伤的作用。