肝激酶B1对高糖条件下ARPE-19细胞增殖、迁移能力的影响及机制研究

摘要

目的 观察肝激酶B1 (LKBl)对高糖条件下人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)增殖、迁移的影响,并探讨其相关调控机制.方法 LKB1真核表达载体pCMV-LKB1转染ARPE-19细胞,筛选稳定过表达LKB1的ARPE-19细胞株.将ARPE-19细胞分为4组:正常对照组、高糖组(HG组)、高糖+空白组(HG+B组)、高糖+LKB1组(HG+LKBl组).用EdU法检测各组细胞增殖情况,Transwell小室观察各组细胞迁移能力,蛋白免疫印迹法检测各组细胞中相关蛋白的表达.结果 EdU法检测结果显示,HG+LKB1组与HG组、HG+B组相比细胞增殖率显著降低(P＜0.01);Transwell小室观察发现,HG+LKBl组与HG组、HG+B组相比细胞迁移能力显著降低(P＜0.01).蛋白免疫印迹法检测结果显示,HG+LKB1组与HG组、HG+B组相比基质金属蛋白酶-2 (MMP2)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达显著降低(P＜0.01),磷酸化的AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)显著增加(P＜0.01),而磷酸化的哺乳类动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)则显著下降(P＜0.01).结论 LKB1可下调MMP2和VEGF的表达,抑制高糖条件下ARPE-19细胞的增殖和迁移,该调控机制可能通过AMPK-mTOR信号通路发挥作用.