响应面分析法优化细菌内毒素的灭活方法

摘要

目的运用响应面分析法的原理和方法对医疗实践中常用的内毒素的灭活方法进行优化,提出一种简便、可靠、快速的内毒素灭活方法。方法对细菌内毒素用双氧水灭活法、多酶清洗液灭活法和干热灭活法进行基于响应面的优化设计,在对双氧水浓度、多酶清洗液的稀释比和干热温度进行单因素实验的基础上,以显色基质鲎试剂测定的残留的内毒素活性为响应指标,设计三因素三水平的响应面分析实验,以此确定最佳的灭活方法,并对理论优化的结果进行实验验证。结果室温下双氧水浓度为10%(V/V)作用时间20 min,多酶清洗液稀释比为1:100作用30 min,然后在150℃的干热烘箱中作用30 min后,显色基质鲎试剂测定内毒素的结果为阴性。结论经过响应面分析法优化的细菌内毒素灭活方法,能够快速高效的灭活结构复杂来源多样的细菌内毒素。