FRET技术研究Apelin受体与G蛋白的相互作用

摘要

目的 探讨Apelin受体与G蛋白之间的相互作用.方法 在HEK293T细胞中建立Apelin受体与各亚型G蛋白的过表达体系,利用荧光共振能量转移技术(fluorescence resonance energy transfer technology,FRET)实时、动态、连续的监测Apelin受体与G蛋白偶联的机制.结果 加入激动剂Apelin-13刺激后,Apelin受体与Gαi1亚基的FRET值没有发生明显的变化(P>0.05),Apelin受体与Gαi2、Gαi3亚基的FRET信号显著增加(P<0.05),而Apelin受体与Gαo、Gαq亚基的FRET信号相对于刺激前显著降低(P<0.05).结论 Ape-lin受体在其激动剂Apelin-13作用下,能够激活G蛋白的Gαi2、Gαi3、Gαo、Gαq亚基,并引起Gαi2、Gαi3亚基构象重排进而与Gγ亚基相互靠近,Gαo、Gαq亚基远离Gγ2亚基,而不与Gαi1亚基发生相互作用.