人参皂苷Rh2诱导PC-3M细胞凋亡及其对新基因GRIM-19表达的影响

摘要

目的:研究人参单体皂苷Rh2对激素非依赖性人前列腺癌细胞(PC-3M细胞株)的致凋亡作用及其对新基因GRIM-19表达的影响.方法:实验分为Rh2高剂量组(40 mg·L-1)、Rh2中剂量组(30 mg·L-1)、Rh2低剂量组(15 mg·L-1)及对照组(未加药组).分别作用于PC-3M细胞24 h,吖啶橙染色观察其对PC-3M细胞的促凋亡作用;RT-PCR和Western blotting方法分别检测Rh2对PC-3M细胞GRIM-19 mRNA及其蛋白表达的影响.结果:Rh2高、中、低剂量组作用于PC-3M细胞24h吖啶橙染色均呈阳性结果.Rh2低剂量组出现典型"出芽"现象,细胞中出现致密鲜亮橙色斑点.对照组细胞呈均匀绿色;RT-PCR结果显示,GRIM-19 mRNA随Rh2浓度的增加表达逐渐增强,Rh2中、低剂量组与对照组比较差异具有显著性(P＜0.05),Rh2高剂量组GRIM-19 mRNA表达与对照组比较差异具有高度显著性(P＜0.01).Western blotting结果与RT-PCR结果相一致,GRIM-19蛋白随Rh2浓度的增加其表达逐渐增强,Rh2中低剂量组与对照组比较差异具有显著性(P＜0.05),Rh2高剂量组GRIM-19蛋白的表达与对照组比较差异具有高度显著性(P＜0.01).结论:Rh2诱导PC-3M细胞凋亡与上调GRIM-19基因和蛋白表达有关,其表达强度呈剂量依赖性.