慢病毒介导的酸性成纤维细胞生长因子基因在乳腺癌细胞MCF-7中的表达及其意义

摘要

目的:探讨慢病毒系统介导的实现酸性成纤维细胞生长因子(FGF 1)在MCF-7细胞中的过表达,获得初步稳定并且大量表达FGF-1的细胞株,为研究FGF-1在肿瘤发生及发展中的作用奠定基础.方法:构建FGF-1的慢病毒表达载体pWPXLd-FGF-1,通过与包装质粒psPAX2、pMD2.G共转染293FT细胞进行病毒包装,用包装成功后病毒液侵染乳腺癌MCF-7细胞,通过流式细胞仪检测侵染效率,通过Western blotting检测GFP-FGF-1的融合表达,通过Wound healing实验初步检测FGF-1对细胞增殖及迁移能力的影响.结果:成功构建了FGF-1的慢病毒表达载体,病毒滴度达到2.8×106 TU·mL-1；获得一株大量表达FGF-1的细胞株,FGF-1的转染效率达60％以上,FGF-1对细胞的增殖及迁移具有一定的促进作用.结论:成功构建FGF-1的慢病毒表达载体并且实现在MCF-7细胞中的大量表达.