微滴式数字聚合酶链反应检测金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌

摘要

目的 采用微滴式数字聚合酶链式反应(ddPCR)技术快速检测饲料中金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌,以满足对猪饲料中病原体精准检测需求.方法 通过已建立的荧光定量PCR方法中引物和探针,建立优化ddPCR条件,梯度稀释质粒,进行特异性、敏感性、重复性实验以及市售10种样品的本底检测.结果ddPCR法检测金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌具有良好的特异性,最低可检测到88 copies/μL,SD为19.7,RSD为2.03％.稳定性测试组间RSD小于6.5％.结论 ddPCR 法特异性好,灵敏性较强,具有良好的重复性,可以作为分子生物学方法来诊断饲料中金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌.