鹿血双抗体夹心间接ELISA检测方法的建立

摘要

通过制备兔抗鹿血和小鼠抗鹿血多克隆抗体,建立了以兔抗为包被抗体,鼠抗为检测抗体的鹿血双抗体夹心间接ELISA检测方法.采用方阵滴定法确定了抗原、抗体的最佳反应浓度,并对ELISA各反应条件进行优化.结果表明:兔抗最佳包被浓度为1:8 000,鼠抗的最佳反应浓度为1:2 000,最佳封闭时间为60 min.该方法对鹿血检测灵敏,可达3×10-4倍稀释度,且对马血、牛血、羊血、猪血的检测结果均为阴性,说明该方法特异性良好.