红花水通道蛋白CtAQP1基因的克隆及功能分析

摘要

为了探究CtAQP1基因的功能,通过对前期红花干旱胁迫转录组数据的挖掘,利用RT-PCR方法从药用植物红花中首次克隆得到1条全长为888 bp的水通道蛋白基因序列,命名为CtAQP1,其编码295个氨基酸,预测分子量为30.2 kD,等电点为8.63,生物信息学分析表明,CtAQP1蛋白属于NIP亚家族。利用基因工程方法构建原核表达载体pET32a-CtAQP1,Western Blot分析验证重组蛋白的特异性表达。耐逆性分析表明,CtAQP1基因可降低大肠杆菌对0.8 mol/L山梨醇模拟干旱环境的耐受性。初步鉴定红花水通道蛋白的功能,为研究CtAQP1基因在红花抵抗非生物胁迫中的分子机制提供理论基础。