Fis对伤寒沙门菌基因表达的系统调节作用

摘要

目的: 探讨伤寒沙门菌调节因子fis对基因表达的系统调节作用.方法: 用自杀质粒介导的同源重组方法制备伤寒沙门菌fis基因缺陷变异株,用脉冲场凝胶电泳分析fis缺陷变异株的基因组结构.利用伤寒沙门菌全基因组DNA芯片分析技术,比较伤寒沙门菌野生株和fis基因缺陷变异株的基因表达谱差异.用重组载体pBADfis回补fis缺陷变异株,选择部分差异表达基因进行qRT-PCR验证,用半固体平板培养观察野生株、fis缺陷变异株和回补株的动力.结果: fis基因缺陷变异株含有二相鞭毛素编码基因的线性质粒缺失,且动力消失;基因表达谱比较分析结果表明,伤寒沙门菌fis基因缺陷变异株在对数生长期94个基因出现表达差异;qRT-PCR分析所选基因表达的结果与芯片分析结果相符;fis缺陷变异株在回补fis基因后,动力及差异表达基因都获得明显恢复.结论: Fis在伤寒沙门菌中对动力、侵袭及多种代谢相关基因的表达发挥重要调节作用.