原代培养乳鼠窦房结细胞膜K_(ATP)通道电流的检测

摘要

目的　观察原代培养乳鼠窦房结细胞膜KATP通道电流及不同药物的干预情况。方法　取培养 2天乳鼠窦房结细胞进行实验 ,将细胞放入灌流槽 ,用细胞灌流液持续灌流 ,并分别先后加入KATP通道开放剂Pinacidil(5 0 μmol/L)或Diazoxide(30 μmol/L)及阻断剂 5 HD(10 0 μmol/L)或Glibenclamide(10 μmol/L) ,采用全细胞膜片钳技术 ,在钳制电压为 - 40mV情况下连续纪录的跨膜电流的变化情况。结果　在用细胞灌流液持续灌流情况下无窦房结细胞跨膜电流出现 ;于灌流液中加入Pinacidil后则产生明显且较稳定的外向电流 ,该电流不被 5 HD所阻断 ,但Glibenclamide可使该跨膜电流明显减小 [由 (92± 8.4 ) pA减小为(1.2± 0 .2 )pA ,阻断率为 98.7% ]。在相同的条件下 ,Diazoxide(30 μmol/L)却不能使窦房结细胞产生跨膜电流。结论　本研究结果提示窦房结细胞膜上有KATP通道的存在 ,Pinacidil和Glibenclamide是其特异性的开放剂及阻断剂