LC-MS-MS快速定量测定人血浆中 ADH及其四种代谢物

摘要

ADH是1种双重金属蛋白酶抑制剂,临床用于治疗高血压和充血性心衰.据国外文献报道[1],ADH体内血药浓度很低,主要有4种微量代谢物,分别命名为3087、3308、3433、3653.其中ADH、3653、3087结构中含有游离的巯基,容易发生体外氧化,所以给生物样品的定量、定性分析带来了极大的困难,普通的HPLC方法根本无法实现准确定量.国外同期研究[2]的血药浓度最低检测限(LLQ)也仅能做到0.5 μg/L,且样品制备方法复杂,分析时间长,不能同时测定原药及其代谢物,难以适应临床药理学研究的要求.本实验室以甲基丙烯酸酯(MA)对上述3种含巯基的化合物进行衍生化处理,采用叔丁基甲醚萃取血浆样品,以多反应离子监测(MRM)同时监测10种目标化合物,充分发挥LC-MS-MS高效、灵敏、快速、选择性好、特异性强的特点,建立了ADH及其代谢物的LC-MS-MS方法.与国外同期研究相比,本法提高了灵敏度,简化了样品制备过程,缩短了分析时间,可以同时测定ADH及其代谢物,从而为该药的Ⅰ期临床研究提供了坚实的定量分析基础,同时说明LC-MS-MS在易分解药物及其微量代谢物的研究中具有广泛的应用前景.……