Dot—ELISA及其在植物病毒单克隆抗体筛选中的应用

摘要

确立了以硝酸纤维素膜(NCM)作固相载体的Dot-ELISA的最适试验程序,并用此技术检测了284个杂交瘤培养上清,筛选出80个分泌抗甜菜花叶病毒(Beet mo(>)ic virus)抗体的上清样品,阳性率达28.17％。用Dot-ELISA测定小鼠抗甜菜花叶病毒多克隆抗体,与常规ELISA比较,结果表明该技术灵敏度较常規ELISA为高,而且具有操作简便、快速、经济以及适于大量样品检测等优点,是杂交瘤筛选的一种比较理想的有效途经。引入亲和素-生物素系统(ABS)后,该技术灵敏度增高了10倍。此外,还在消除非特异性反应方面进行了某些探索。