条件培养基对日本血吸虫卵黄培养细胞Ag-NORs的影响

摘要

目的以核仁组织区相关嗜银蛋白（Ag-NORs）为评价指标,观察条件培养基对日本血吸虫卵黄培养细胞的影响。方法灌注法获取28d虫龄的日本血吸虫虫体,雌雄分离后冷消化法制备细胞悬液,调细胞为1×106个/ml,联合法接种细胞。将接种于小盖玻片上的血吸虫卵黄细胞随机分为对照组和实验组2组。对照组用常规培养基即RPMI-1640含20%小牛血清附加常量抗生素（青霉素1×105U/L,链霉素100mg/L）培养,实验组培养基为常规培养基与培养的鼻咽癌细胞上清液的条件培养基1∶1的混合液。在培养的第7d、14d、21d、28d、35d时,定时对各组卵黄培养细胞进行Ag-NORs染色,光镜下观察、拍照,同时随机选取50个左右染色细胞输入HPIAS-2000图像分析仪测定Ag-NORs光密度值,并做统计分析。结果培养第1～5周,实验组细胞Ag-NORs均深于对照组细胞;随着培养时间的延长,两组细胞核内着色颗粒均逐渐减少;两组培养细胞的Ag-NORs含量均逐渐降低,对照组下降较快,实验组下降较缓。相同培养时间比较,实验组培养细胞的Ag-NORs含量均显著高于对照组（P〈0.05）。实验组细胞之间两两比较,除第21d与28d（P〉0.05）无显著性差异外,其余各组差异均显著（P〈0.01）;对照组细胞之间两两比较,除第28d与35d外（P〉0.05）,其余各组差异均显著。结论条件培养基不仅可促进卵黄培养细胞的分裂增殖,而且能保持卵黄细胞在培养过程中的分裂增殖活性。