鼠胚胎成纤维细胞饲养层及其与肝基质联合对日本血吸虫童虫培养细胞LDH、ACP影响的研究

摘要

目的以乳酸脱氢酶(LDH)、酸性磷酸酶(ACP)为评价指标,研究鼠胚胎成纤维细胞(MEF)饲养层及其与肝基质联合对日本血吸虫童虫培养细胞代谢的影响.方法实验分MEF与肝基质联合组(后简称联合组)、MEF组、肝基质组和对照组4组.联合组与肝基质组预先铺敷肝基质,MEF组和对照组未铺敷肝基质,将虫龄21 d的日本血吸虫童虫细胞分别接种于预先铺敷或未铺敷肝基质的小盖玻片上.肝基质组和对照组细胞培养于RPMI-1640含20%小牛血清附加常量抗生素的常规培养基中,联合组与MEF组的细胞培养于有MEF饲养层的常规培养基中.培养第7d,运用酶细胞化学方法对日本血吸虫童虫培养细胞进行LDH、ACP染色,Olympus BX-51显微镜下观察并拍照,HIPAS-2000图像分析仪测定其含量,并作统计分析.结果 4组童虫培养细胞其LDH、ACP活性不同.LDH、ACP着色按联合组、MEF组、肝基质组、对照组依次变浅.定量分析显示,培养细胞的LDH含量,各组之间两两比较差异具显著性(P<0.01);联合组、MEF组、肝基质组培养细胞的ACP含量两两比较存在显著差异(p<0.01),联合组、MEF组与对照组之间比较差异具统计学意义(P<0.01),而肝基质组与对照组之间差异无显著性(P>0.05).结论 MEF饲养层能促进日本血吸虫童虫培养细胞的代谢,并能与肝基质协同促进培养细胞代谢.