siRNA下调NF-κB p65基因表达影响人胆管癌QBC939细胞凋亡

摘要

目的 运用RNA干扰技术下调胆管癌细胞株QBC939中核转录因子κB(NF-κB)p65基因表达对其肿瘤细胞生长的抑制作用.方法 以阳离子脂质体LipofectamineTM2000作为转染试剂,将体外合成的人NF-κBp65的siRNA转染入胆管癌细胞QBC939.RT-PCR测定细胞内NF-κB p65 mRNA的表达.用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测NF-κB亚单位p65的DNA结合活性的改变.运用免疫组化、流式细胞仪、激光共聚焦法检测p65基因表达下调对QBC939细胞凋亡的影响.结果 体外合成的人NF-κB p65 siRNA有效抑制了QBC939细胞中NF-κB p65 mRNA的表达(P<0.01),同时ELISA结果显示,靶向NF-κB p65 siRNA组的p65亚单位与DNA结合活性明显低于对照组(P<0.05),免疫组化DAPI核染色、流式细胞仪及激光共聚焦检测观察显示下调p65基因表达能够诱导QBC939细胞凋亡.结论 NF-κB p65的siRNA在胆管癌细胞QBC939调控方面起重要作用,通过沉默其表达可诱导胆管癌细胞凋亡抑制其生长增殖.