蟾蜍灵对K562细胞凋亡诱导作用及bcl-2基因表达的影响

摘要

目的探讨中药蟾酥有效成分蟾蜍灵（bufalin）对人白血病细胞系K562细胞增殖和凋亡及bcl-2基因表达的影响。方法MTT实验测定K562细胞对蟾蜍灵的敏感性；原位缺口末端标记法（TUNEL）观察细胞凋亡率；琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡的DNA断裂情况；半定量RT—PCR技术检测bcl-2mRNA表达。结果蟾蜍灵对K562细胞生长具有明显的抑制作用，MTT实验显示，蟾蜍灵对K562细胞的IC50值为0．013μmol·L^-1，统计学分析表明差异具有显著性（P〈0．01）；蟾蜍灵可明显诱导K562细胞调亡（P〈0．01），药物作用6h、12h和24hK562细胞的凋亡率分别为20．36％、34．35％和48．16％；经琼脂糖电泳，蟾蜍灵作用细胞可见到DNA梯形条带；bcl-2mRNA表达3h开始下降，6～12h持续下调，与对照组相比具有显著差异（P〈0．01）。结论蟾蜍灵对K562的增殖抑制作用可能是因为它的凋亡诱导作用，而K562细胞凋亡可能是由于bcl-2基因表达改变。