17-AAG对K562和HL-60细胞凋亡的诱导作用及其联合化疗药物对细胞增殖的影响

摘要

目的：研究热休克蛋白90抑制剂17-AAG对K562和HL-60细胞的凋亡诱导作用及其联合化疗药物对细胞增殖的影响，以探讨白血病治疗的新的分子靶点，为Hsp90抑制剂单独或联合治疗急性白血病、增强其治疗效果提供理论依据。 方法：以细胞株K562和HL-60为研究对象。K562和HL-60细胞株分别经不同浓度的17-AAG处理，采用MTT法测定细胞的生长抑制作用。应用Annexin原理V-FITC/PI双染法测定细胞凋亡率变化，应用Hoechst 33258单染法观察凋亡细胞的形态变化。不同浓度的17-AAG、阿糖胞苷、表柔比星单独或联合分别处理细胞株K562和HL-60，中效原理法判断联合用药的相互作用。 结果: (1).对于K562和HL-60细胞株，17-AAG能抑制其增殖，诱导其凋亡，增殖抑制率和凋亡率均呈时间-剂量依赖性。 (2).17-AAG对K562和HL-60细胞株48h的中效抑制浓度分别0.664±0.003μmol/L和1.246±0.032μmol/L。 (3).17-AAG、阿糖胞苷、表柔比星单用或联合作用于K562和HL-60细胞株，均呈现剂量依赖性抑制效应。 (4).17-AAG与表柔比星或阿糖胞苷联合作用于K562、HL-60细胞株，在低抑制效应时呈现拮抗作用，高抑制效应时呈现协同作用。 (5).改变17-AAG与柔红霉素或阿糖胞苷的联合用药比例，合用效应不同。 结论:热休克蛋白90抑制剂17-AAG作为一种新型的抗肿瘤新药，可有效抑制细胞株K562和HL-60的生长，诱导细胞凋亡，与化疗药物阿糖胞苷、表柔比星联合使用可呈现抑制协同作用，联合用药的比例是影响抑制效应的重要因素。

目录

文摘

英文文摘

声明

引言

材料与方法

材料

1.1细胞株种类

1.2主要试剂

1.3主要实验仪器

1.4主要试剂的配制

方法

2.1细胞培养

2.2四氮唑盐比色法(MTT实验)

2.3细胞形态学观察(Hoechst 33258 单染法观察凋亡细胞核的形态变化)

2.4细胞凋亡检测(Annixin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡率变化)

2.5单药及联合用药抑制效应

2.6改变联合用药比例的抑制效应

2.7结果判定

2.8统计学处理

结果

2.1 17-AAG抑制白血病细胞增殖的抑制作用

2.2 17-AAG对白血病细胞的形态的影响

2.3 17-AAG诱导白血病细胞凋亡的诱导作用

2.4 17-AAG和表柔比星单用或联合作用于K562细胞的抑制效应

2.5 17-AAG、阿糖胞苷单用或联合作用于HL-60细胞的抑制效应

2.6 17-AAG、表柔比星单用或联合作用于HL-60细胞的抑制效应

2.7 17-AAG与阿糖胞苷或表柔比星合用时合用效应和合用指数的关系。

2.8 联合用药比例改变时Fa与CI的关系、

讨论

结论

参考文献

综述 热休克蛋白与急性白血病

攻读学位期间的研究工作

致谢