山桐子ISSR-PCR反应体系的建立与引物筛选

摘要

以山桐子幼嫩叶片为材料,通过对CTAB法(十六烷基三甲基溴化铵法)的改良,摸索出适于山桐子基因组DNA提取的方法,并以核酸纯度、片断分布情况等指标来评价,获取高质量基因组DNA;用2个不同样品对65条ISSR引物进行了筛选,筛选出了22条扩增图谱清晰的ISSR引物.结果表明,获得的基因组质量较高,获得的ISSR引物适用于山桐子,同时也表明反应体系对山桐子的ISSR分析是可行的;并对影响山桐子基因组DNA的制备、引物筛选及扩增反应因素进行了简要的分析讨论.