引物筛选
引物筛选的相关文献在2000年到2022年内共计402篇,主要集中在园艺、农作物、林业
等领域,其中期刊论文295篇、会议论文13篇、专利文献75779篇;相关期刊148种,包括生物技术通报、北方园艺、中国园艺文摘等;
相关会议11种,包括中国植物保护学会2014年学术年会、中国园艺学会南瓜分会第四届会员代表大会暨学术研讨会、中国园艺学会2011年学术年会等;引物筛选的相关文献由1498位作者贡献,包括王书珍、金卫斌、王芳等。
引物筛选—发文量
专利文献>
论文:75779篇
占比:99.60%
总计:76087篇
引物筛选
-研究学者
- 王书珍
- 金卫斌
- 王芳
- 张明菊
- 徐刚标
- 徐田军
- 李志良
- 王日昕
- 范国强
- 任丽
- 孔令锋
- 朱高浦
- 李寿国
- 李琪
- 章毅颖
- 褚云霞
- 赵洪
- 邓姗
- 陈海荣
- 丁君
- 乌云塔娜
- 于海龙
- 仇雪梅
- 冯艳微
- 刘圣聪
- 刘建秀
- 刘相全
- 包玉龙
- 姜志强
- 姜绪
- 孙典巧
- 孙悦娜
- 孟雪松
- 安调过
- 常亚青
- 张伟杰
- 张涛
- 江玉梅
- 王卫军
- 王志勇
- 王春梅
- 王秀利
- 臧德奎
- 郭海林
- 韦秀梅
- 高强
- 何天友
- 何长青
- 刘勇男
- 刘必扬
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安明珠;
赵世伟;
朱文露;
韩博;
文亦芾;
周凯
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摘要:
为筛选适用于鸭茅物种的基因引物序列,开展相关系统发育学研究,通过搜集鸭茅近缘物种叶绿体基因引物,使用PCR扩增技术和琼脂糖凝胶电泳检测来筛选出目的基因片段,对目的基因进行BLAST序列比对。结果表明:试验搜集的35对引物中共能筛选出trnL-F 1、trnL-F 5、rpL162、rpL164、matK 6、matK 7、rbcL 1共7对引物,扩增条带唯一且清晰,扩增产物经测序及比对结果后验证均为目的基因。本研究筛选的7对叶绿体基因引物扩增效果较好,适用于鸭茅的系统发育分析。
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安仕博;
陈旭;
戴鹏;
侯洋旸;
臧连生
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摘要:
不同地理种群的赤眼蜂在遗传、生理和生态适应性等方面均表现出不同程度的分化。为探究不同地理种群的玉米螟赤眼蜂Trichogramma ostriniae和螟黄赤眼蜂Trichogramma chilonis在基因型上的差异并进行准确鉴定,本研究筛选了可用以区分不同地理种群玉米螟赤眼蜂和螟黄赤眼蜂的微卫星引物。结果表明:从已报道的10对微卫星引物中,筛选出2对引物(序列号:KT834825,KT834827)可以区分玉米螟赤眼蜂中的黑龙江地理种群与吉林和辽宁两个地理种群;并筛选出2对引物(序列号:KT834822,KT834825)可以区分黑龙江、贵州和广东3个不同地理种群的螟黄赤眼蜂。该结果进一步证实赤眼蜂不同地理种群间可能存在明显的基因型差异,研究结果为精准鉴别玉米螟赤眼蜂和螟黄赤眼蜂不同地理种群,以及进一步探寻优势种群的高效繁育与应用技术奠定了理论基础。
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许建军;
马燕;
吴其超;
王宝盛;
臧德奎
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摘要:
为了筛选出具有高多态性的cpDNA和ITS序列引物,用于研究野生玫瑰自然种群的分子谱系地理,以野生玫瑰8个种群为试材,通过12对叶绿体基因组引物和4对核基因组ITS引物的PCR扩增和PCR产物测序,筛选出trnL-trnF、rpl20-rps12、rbcl、ITS1四对具有高多态性的引物。序列变异计算与系统发育树结果显示,8个野生玫瑰种群变异较低,可划分为2支。筛选出高多态性的cpDNA引物3对和ITS引物1对,适用于研究野生玫瑰系统发育和谱系地理结构,能够进一步探究濒危物种野生玫瑰的谱系地理。
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李守明;
史荣梅;
李辉玲
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摘要:
为探索了解西北地区大蒜及其野生蒜资源之间的亲缘关系及变异特性,以25份西北地区及野生大蒜鳞茎和叶片为材料提取模板DNA,筛选适于简单重复序列(SSR)-PCR的反应体系。采用L_(16)(4^(3))正交表设计正交试验并进行单因素试验,对影响大蒜SSR-PCR的相关体系参数进行优化。结果表明,适用于大蒜的SSR反应体系总体积为10μL:模板DNA 30.0 ng,正反引物均为0.5μmol/L,2×Taq PCR Mix 5.0μL,其余用dd H_(2)O补齐。扩增程序:94°C预变性3 min;94°C变性30 s,不同引物最佳退火温度退火45 s,72°C延伸90 s;30次循环的最后1次循环72°C延伸设为10 min,4°C保存扩增产物。最终在上述PCR条件下从50对SSR通用引物中筛选出13对多态性好、稳定性高的适用于大蒜SSR-PCR多样性分析的候选引物。
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潘蓉蓉;
钟秋蔚;
张露;
马际凯;
程强强;
袁生贵;
孙荣喜
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摘要:
以江西九连山国家级自然保护区毛红椿天然林为研究材料,对毛红椿AFLP反应体系中的DNA提取方法、酶切与连接步骤、连接产物稀释倍数、预扩增产物稀释倍数等影响因子进行优化,并筛选AFLP多态性高的引物。结果表明:不同提取方法对DNA质量有很大影响,试剂盒法提取的DNA杂质少,质量高;酶切与连接采用一步法完成;连接产物最适稀释倍数为3倍,预扩增产物最适稀释为10倍;利用4个天然居群的毛红椿基因组DNA从64对引物组合中筛选出4对具有多态性扩增条带的引物,总扩增出147个位点,其中多态性位点122个,平均多态位点百分率84.36%,多态性较高,适用于毛红椿AFLP分析的4对引物组合分别是:E1/M6、E4/M7、E5/M3、E5/M8,为毛红椿遗传多样性和种质资源研究奠定了基础。
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王君芳;
杜和禾;
汤诗琪;
周永灿;
曹贞洁;
孙云
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摘要:
从海南发病的卵形鲳鲹中分离到一株病毒,经测序分析,推测该病毒为神经坏死病毒.提取病鱼脑部、眼部总RNA,并用其反转的cDNA为模板,分段克隆出RNA1和RNA2片段,测序后通过拼接获得其基因组,命名为GPNNV(Golden Pompano Nervous Necrosis Virus).系统进化树分析结果表明,GPNNV属于RGNNV基因型.为了获得GPNNV特异性强、灵敏度高的检测引物,本研究基于GPNNV的RNA2保守区设计了9对检测引物,然后通过普通PCR及实时荧光定量PCR技术,筛选出1对最佳引物,可以检测到病毒含量为10copies·μL-1的样本.采用筛选出的引物,在病鱼组织中进行检测,结果表明该引物可以准确检测出感染病毒性神经坏死病毒的样本,具有较高的实际应用价值.以上结果可为卵形鲳鲹神经坏死病毒病的诊断提供有效的方法,对卵形鲳鲹神经坏死病毒病的预防具有重要意义.
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李进;
陈仕勇
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摘要:
[目的]本研究对影响燕麦目标起始密码子多态性聚合酶链式反应(SCoT-PCR)的4个因素(模板DNA、引物、Mix混合液用量及退火温度)进行了优化,并通过最优体系进行了多态性引物的筛选.[方法]以4份燕麦品种DNA为模板,采用L9 (33)正交试验确定模板DNA、引物、Mix混合液用量的最优反应体系,在48~ 54°C温度范围设置8个梯度进行退火温度筛选,并通过最优体系对80条引物进行了多态性筛选和验证.[结果]优化后的反应体系总体积为20μl,包含2 μl模板DNA(10 ng·μl-1)、2μl引物(10 μmol· L-1)、9μl Mix和7μl ddH2O.筛选出了扩增效果和多态性较好的36条引物及各自的最佳退火温度.[结论]成功优化建立燕麦SCoT-PCR扩增体系,该体系的建立将为燕麦品种遗传多样性分析、品种指纹图谱构建以及分子标记辅助育种等提供重要的参考依据.
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王锦秀;
任道全;
王新月;
陈生熬;
宋勇
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摘要:
为研究塔里木河流域叶尔羌高原鳅(Triplophysa yarkandensis)群体的遗传多样性,基于高通量测序平台,对叶尔羌高原鳅基因组进行测序,并筛选出符合条件的微卫星位点,设计100对用于PCR扩增的引物,最终筛选出39对具有多态性的引物,挑选多态性较高的15对在5个河段叶尔羌高原鳅种群中进行扩增,分析不同种群的遗传多样性和种群分化情况.结果显示,5个叶尔羌高原鳅群体的平均等位基因数(Na)和有效等位基因数(Ne)分别为48.467和15.181,平均观测杂合度(Ho)和期望杂合度(He)分别为0.578和0.929,多态性信息含量(PIC)为0.893,种群间遗传分化系数(Fs,)为0.102.其中,车尔臣河群体等位基因数最多(18.143),阿克苏河群体等位基因数最少(10.429);阿克苏河群体的观测杂合度最高(0.706),台特玛湖群体的观测杂合度最低(0.517);阿尔干群体的多态信息含量最高(0.877),阿克苏河群体的多态信息含量最低(0.760);阿克苏河与台南河群体的遗传距离最小(0.606),阿尔干与台南河群体遗传距离最大(1.901);阿尔干群体与台南河群体遗传相似度最低(0.149),阿克苏河与台南河群体的遗传相似度最高(0.545).群体遗传结构显示,车尔臣河与台特玛湖、阿克苏河与台南河、阿尔干群体分别聚为独立分支.研究表明,塔里木河各个河段叶尔羌高原鳅之间虽然有一定的差异,但仍然有基因交流现象.
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丁刘慧子;
邳植;
吴则东
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摘要:
为了筛选适用于甜菜品种鉴定的DAMD分子标记,建立高效的甜菜品种鉴定方法,利用从文献中获得的29条DAMD引物对40个甜菜品种进行PCR扩增.结果表明:URP1F、OGRB01、URP4R、URP2R、URP6R、URP13R、URP32F、URP17R具有高多态性,8条引物总计可以扩增101条带,其中99条为多态性条带,多态性百分比为97.22%,可确定为鉴定甜菜品种的核心引物.根据扩增产物,可采用特征谱带法,单独使用引物URP6R或引物URP1F和引物URP17R共同使用鉴别40个甜菜品种.同时根据扩增产物建立0、1数据库计算出品种间遗传距离范围为0.01~0.25,在遗传距离为0.25时,可将40个甜菜品种分为2个类群.类群之下可分成多个亚群,通过遗传距离建立的聚类图也可将甜菜品种逐一鉴别.研究表明基于DAMD引物建立的高多态性指纹图谱对今后鉴别甜菜品种的真实性提供了高效快捷的方法.
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李辉玲;
董洁;
张国儒;
火顺利;
叶远荣;
杜珊珊;
张建文
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摘要:
为建立和优化色素辣椒的InDel标记PCR反应体系,筛选多态性良好且重复性高的引物,为InDel分子标记在色素辣椒辅助育种、品种纯度鉴定及遗传多样性分析等提供可靠的技术支持.采用正交试验、单因素试验方法,对影响扩增体系中的模板DNA用量、引物浓度、2×Taq PCR Mix添加量等参数进行3因素4水平的正交试验比较分析,对循环数进行单因素试验优化分析.结果表明,对InDel-PCR体系扩增结果的影响程度中引物浓度最大,其次是模板DNA用量,而2×Taq PCR Mix添加量的影响不大.根据检测结果,出于成本和模板DNA用量的考虑,确定最佳InDel-PCR反应体系(10μL):模板DNA用量为35 ng、引物浓度为0.5μmol/L、2×Taq PCR Mix添加量为5μL.扩增程序:94°C预变性3 min;94°C变性30 s,退火30 s,72°C变性60 s,35个循环;72°C变性5 min;扩增产物在4°C保存.从240对InDel通用引物中最终筛选出14对适用于色素辣椒InDel-PCR候选引物.InDel标记是基于PCR的分子技术,选择适宜的引物及模板DNA浓度对扩增出清晰、稳定的条带很重要,优化后的10μL InDel-PCR反应体系及扩增程序,成功筛选出14条多态性较高的InDel引物,为后续的色素辣椒分子标记研究提供了可靠技术依据.
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Wen Jing;
文静;
Ma Yuntong;
马云桐;
Chen Xin;
陈新
- 《世界中医药学会联合会道地药材多维评价专业委员会成立大会暨第一届学术年会》
| 2015年
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摘要:
目的:首次对川产道地药材川牛膝表观遗传多样性进行研究,建立并优化川牛膝甲基化敏感扩增多态性技术(MSAP)最佳反应体系. 方法:以川牛膝苗期叶片为材料,利用正交试验设计对川牛膝MSAP反应体系中预扩增和选择性扩增中关键影响因素进行考察,建立川牛膝MSAP反应最佳体系. 结果:川牛膝MSAP最佳反应体系为:酶切体系(20μL),250ng DNA、0.5μL EcoRI、0.1μL HpaⅡ或0.3μL MspⅠ(HpaⅡ);连接体系(15μL):10μL酶切产物、0.5μL EcoRI adaptor、0.5μL HpaⅡ/MspⅠadaptor、0.5μLT4连接酶;预扩增体系(20μL):连接产物1μL、rTaq酶1U、引物分别1μL、dNTP(Mg2+)2μL;选择性扩增体系(20μL):预扩产物稀释50倍、rTaq酶1U、引物1μL、dNTP(Mg2+)3μL,并运用优化后的体系,最终从川牛膝MSAP的256对引物中筛选出有效引物6对. 结论:优化后的体系保证了稳定的图谱、清晰的条带,筛选出的6对引物组合特异性好,能够用于后续川牛膝DNA甲基化相关实验研究,同时,为其他药用植物MSAP分析提供了参考.
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赖爱萍;
易龙;
苏华楠
- 《中国植物保护学会2014年学术年会》
| 2014年
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摘要:
柑橘溃疡病菌是一种由地毯苹黄单胞杆菌柑橘致病变种(Xanthomonas axonopo-di.s pv.citri)引起的危险性细菌病害.为初步了解赣南地区柑橘溃疡病菌遗传多样性,本实验选取了分离自赣南17个县市的40株柑橘溃疡病菌株,初步筛选用于赣南地区柑橘溃疡病菌SSR分子标记分析的引物.结果表明,有9对SSR引物得到的扩增条带多态性高、稳定性好,可用于赣南地区柑橘溃疡病菌株遗传多样性分析,本实验为进一步对赣南地区柑橘溃疡病菌进行系统的遗传多样性研究提供了基础.
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SHI Qian-qian;
史倩倩;
WANG Yan;
王雁;
ZHOU Lin;
周琳
- 《中国园艺学会观赏园艺专业委员会2011年学术年会》
| 2011年
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摘要:
本试验以牡丹叶片DNA为模板,对SRAP-PCR反应程序进行了研究,确定了适合的反应程序,即94°C预变性5min;94°C变性1min,33°C退火1min,72°C延伸1min,共5个循环;随后94°C变性1min,52°C退火1min,72°C延伸1min,共35个循环;最后72°C延伸10min.并基于毛细管电泳技术,采用正交设计L18(37)对SRAP-PCR反应体系的五因素(Taq酶,Mg2+,模板DNA,dNTP,引物)3个水平对牡丹SRAPPCR反应体系进行了研究,建立了牡丹SRAP最佳反应体系:模板DNA 50ng,dNTP 0.25 mmolL-1,Mg2+浓度2.5 mmolL-,引物浓度0.4 μmolL-,Taq DNA聚合酶0.5U,总体积为25 μL.Taq DNA聚合酶0.5U,总体积为25μL.各因素对扩增结果影响程度均不同:dNTPs>引物>DNA模板>Mg2+>Taq酶.运用该体系从756个SRAP引物组合中筛选出扩增条带清晰、多态性好的26个引物组合,并证明了该体系稳定可靠.这一体系的建立及多态性引物组合的筛选为今后利用SRAP技术进行牡丹的相关研究奠定了科学基础.
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- 《中国植物保护学会2008年学术年会》
| 2008年
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摘要:
以小麦矮腥黑粉菌基因组DNA为模板,用正交分析和单因素水平相结合的方法对ISSR反应体系中的Mg2+浓度、引物浓度、dNTP含量、Taq酶用量和模板DNA浓度进行优化,建立了小麦矮腥黑粉菌ISSR-PCR反应的优化反应体系,即在25μl反应体系中,Mg2+ 2.0mmol/L、引物1.2 μmol/L、dNTP0.1mmol/L、Taq酶1.0U和模板DNA 30ng.通过对40个ISSR引物的退火温度进行优化,筛选出了一些多态性较好的ISSR引物,为小麦腥黑粉菌遗传多样性研究奠定了基础.