金属硫蛋白基因MT1A在大肠杆菌中的自诱导表达条件优化及其抗镉性

摘要

为了提高金属硫蛋白基因MT1A的高效表达和对重金属的抗性,以菌体密度、可溶性目的蛋白表达量为评价指标,对工程菌自诱导的培养条件(诱导时间、诱导温度)和培养基组分(蛋白胨、酵母粉、甘油、葡萄糖、乳糖)进行优化,并对其抗镉(Cd)性进行分析.结果表明,最优自诱导培养基组分为2.0％蛋白胨、2.0％酵母粉、0.3％甘油、0.05％葡萄糖、0.3％乳糖;重组菌自诱导表达最优培养条件为37℃培养3h,然后25℃继续培养13h,此时菌体密度、可溶性蛋白表达量、可溶性蛋白相对产量均最高,分别比未优化ZYM-5052培养基提高77.7％、94.0％、244.8％.当Cd2+浓度为0.5 mmol/L时,高效表达金属硫蛋白的菌株具有明显的抗Cd活性.