禽流感病毒PA基因的原核表达载体的构建及鉴定

摘要

以重组质粒pcDNA-PA为模板扩增PA全基因,并构建原核表达载体pGEX-6p-1-PA.根据GenBank 公开发表的禽流感病毒PA基因的序列设计引物,用PCR方法从重组质粒pcDNA-PA中扩增禽流感病毒的PA基因,将该基因定向插入到原核表达载体pGEX-6p-1中,然后将连接产物转化宿主菌DH5α,挑取阳性克隆进行PCR和BamHⅠ、NotⅠ双酶切鉴定并测序.测序结果表明,禽流感病毒PA基因全长2 151 bp, 编码717个氨基酸,原核表达载体pGEX-6p-1-PA已构建成功.从而为禽流感蛋白PA的表达及其多克隆抗体的制备奠定了基础.