产物变性胶纯化实现连续PCR的多轮扩增

摘要

产物弥散成片是PCR操作中一种比较常见的异常现象,在连续PCR实验中会导致扩增的最终失败。这种异常产生的内在机制是扩增过程中非全长部分链的合成、积累及其对后续扩增的干扰。缓解这种PCR扩增异常现象的途径包括抑制非全长链的合成,以及在重复扩增之前去除模板中的非全长链成分。本文显示通过碱变性琼脂糖电泳然后割胶纯化获得下一轮扩增模板的方式能够有效地避免连续扩增中产物弥散成片的异常扩增。为有效地进行重复PCR扩增提供了一个新的途径。结果进一步证实了正常PCR扩增中非全长链产生的不可避免及其对新生链合成的干扰效应。