白藜芦醇对刀豆素A诱导小鼠自身免疫性肝炎的保护作用

摘要

目的:探究白藜芦醇(Res)对刀豆素A(Con A)诱导小鼠自身免疫性肝炎(AIH)的保护作用及机制。方法:C57BL/6小鼠随机均分为对照组、AIH组、AIH+低剂量Res组和AIH+高剂量Res组,AIH+低剂量Res组和AIH+高剂量Res组小鼠每天分别以5 mg/(kg·d)及20 mg/(kg·d)Res灌胃,持续5 d;对照组小鼠以相同体积生理盐水灌胃,AIH组小鼠不灌胃;灌胃3 d后,AIH组、AIH+Res低剂量组及AIH+Res高剂量组经尾静脉单次注射Con A 20 mg/kg建立AIH模型;建模48 h时处死各组小鼠,收集肝脏组织,Real-time PCR检测Foxp3、RORγt、Bax、Bcl-2、Caspase-3及Caspase-9 mRNA相对表达水平,Western blot检测Foxp3、RORγt、Bax、Bcl-2、Cleaved Caspase-3及Cleaved Caspase-9蛋白相对表达水平,肝组织HE染色观察肝脏组织学变化、TUNEL染色观察肝细胞凋亡情况;同时收集外周血,检测血清中AST、ALT/GPT、IL-6、IL-10与IL-17A水平。结果:与对照组小鼠相比,AIH组小鼠血清AST、ALT/GPT、IL-6、IL-17A水平,肝组织中肝细胞凋亡水平、Bax、Caspase-3、Caspase-9、RORγt mRNA表达水平、Bax、Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9、RORγt蛋白显著上升,血清IL-10,肝脏组织Bcl-2、Foxp3 mRNA和蛋白表达水平显著下降(P<0.05),HE染色结果显示肝脏组织损伤程度与淋巴细胞浸润程度显著增加;与AIH组小鼠相比,AIH+高剂量Res组小鼠血清AST、ALT/GPT、IL-6、IL-17A,肝脏组织中肝细胞凋亡水平、Bax、Caspase-3、Caspase-9、RORγt mRNA表达水平、Bax、Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9、RORγt蛋白显著下降,血清IL-10、肝脏组织Bcl-2、Foxp3 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05),HE染色结果显示肝脏组织损伤程度与淋巴细胞浸润程度显著减轻;AIH+低剂量Res组小鼠上述指标介于AIH组及AIH+Res高剂量组之间。结论:Res可能通过减少血清炎症因子的表达,抑制Con A诱导的AIH小鼠肝脏细胞的凋亡,而这种保护作用随Res剂量的增加而增强。