S100A6对黑色素瘤细胞增殖、侵袭、迁移的影响及机制研究

摘要

目的:探讨S100A6调控磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路对黑色素瘤细胞(A375)增殖、侵袭和迁移影响.方法:首先将A375细胞分为4组:空白对照组(正常培养)、空载体对照组(转染pcDNA3.0空载体质粒)、S100A6转染组(转染pcDNA3.0-S 100A6质粒)、S100A6转染+抑制剂组(转染pcDNA3.0-S 100A6质粒与PI3K抑制剂LY294002).采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞S100A6 mRNA相对表达量;MTT法检测各组细胞增殖活力;Transwell检测各组细胞侵袭能力;划痕线法检测各组细胞的迁移能力;western blotting检测A375各组细胞PI3K/Akt信号通路相关分子PI3K、p-PI3K、GSK3β、Akt、p-Akt蛋白及c-Myc、CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平.结果:与空白对照组、空载体对照组相比,S100A6转染组细胞中S100A6mRNA表达水平显著升高(P＜0.05),细胞存活率、侵袭细胞数和迁移细胞数均显著增高(P＜0.05),细胞中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、GSK3β、c-Myc、CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平均显著升高(P＜0.05);与S100A6转染组相比,S100A6转染+抑制剂组细胞中S100A6 mRNA表达水平无显著变化(P＞0.05),细胞存活率、侵袭细胞数和迁移细胞数均显著降低(P＜0.05),细胞中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、GSK3β、c-Myc、CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平均显著降低(P＜0.05).结论:S100A6可促进黑色素瘤细胞A375增殖、侵袭和迁移,其机制可能是通过激活PI3K/Akt信号通路实现的.