miR-1827抑制甲状腺乳头状癌细胞增殖、侵袭转移及对c-Myc基因表达的影响

摘要

目的:探讨微小RNA 1827(miR-1827)对甲状腺乳头状癌细胞增殖、侵袭转移及对c-Myc基因表达的影响.方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测miR-1827在TPC-1和Nthy-ori 3-1细胞中的表达,分别用CCK-8、细胞侵袭和蛋白质印迹法(Western blot)检测过表达及干扰miR-1827对TPC-1细胞增殖、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响.采用TargetScan和双荧光素酶报告基因实验分析miR-1827与c-Myc之间的作用靶点,通过qPCR和Western blot检测miR-1827和c-Myc之间的调控关系.通过Western blot分析miR-1827对TPC-1细胞中Akt-mTOR通路的影响.雷帕霉素抑制Akt-mTOR通路后,检测miR-1827对甲状腺乳头状癌细胞增殖、侵袭转移以及对c-Myc基因表达的影响.结果:TPC-1细胞中miR-1827表达水平明显低于Nthy-ori 3-1细胞(P＜0.01),过表达miR-1827能够抑制TPC-1细胞的增殖和侵袭(P＜0.05),E-cadherin蛋白表达量明显上升(P＜0.01),N-cadherin蛋白表达量明显下降(P＜0.01).下调miR-1827能够促进TPC-1细胞的增殖、侵袭和EMT(P＜0.05).c-Myc是miR-1827的直接作用靶点,过表达miR-1827抑制c-Myc表达(P＜0.01),敲低miR-1827促进c-Myc表达(P＜0.01).miR-1827激活了TPC-1细胞中Akt-mTOR信号通路,雷帕霉素作用于细胞后,明显降低了miR-1827对TPC-1细胞增殖、侵袭和EMT以及c-Myc表达的抑制作用(P＜0.05).结论:miR-1827通过Akt-mTOR途径抑制了甲状腺乳头状癌细胞的增殖、侵袭转移以及c-Myc的表达.